بهینهسازی انتقال ژن به عدس (Lens culinaris Medik.) با استفاده از آگروباکتریوم | ||
| پژوهشهای حبوبات ایران | ||
| مقاله 4، دوره 8، شماره 2، 1396، صفحه 84-95 اصل مقاله (700.86 K) | ||
| نوع مقاله: مقالات پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22067/ijpr.v8i2.52960 | ||
| نویسندگان | ||
| فاطمه ذاکر تولایی* 1؛ عبدالرضا باقری2؛ بهزاد قره یاضی3؛ کایران کمار شارما4 | ||
| 1مجتمع اموزش عالی شیروان | ||
| 2دانشگاه فردوسی مشهد | ||
| 3- پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران | ||
| 4انستیتو تحقیقات بین المللی محصولات نیمه گرمسیری( ICRISAT) | ||
| چکیده | ||
| عدس از جمله حبوبات مهم در ایران است که با توجه به وقوع تنشهای مختلف در مناطق کشت آن در کشور، اصلاح آن جهت افزایش تحمل به تنشهای زیستی و غیرزیستی از اهمیت بسزایی برخوردار است. در این زمینه، کارآیی استفاده از فناوریهای نوین از جمله کشت اینویترو و انتقال ژن، قابلتوجه میباشد. در این مطالعه بهینهسازی انتقال ژن به عدس با استفاده از ژن گزارشگر gus با واسطه اگروباکتریوم تومیفاشینس انجام شد. در این پژوهش اثر عواملی مانند نوع ریزنمونه، آنتیبیوتیک مورد استفاده، غلظت باکتری، مدتزمان کشت مشترک، تأثیر استوسرینگون، بر موفقیت تراریزش بررسی شدند. نتایج پژوهش نشان داد که ریزنمونه لپه شاخهدارشده روی محیط کشت دارای سیتوکنین پس از حذف سرشاخهها یک ریزنمونه خوب برای فرایند انتقال ژن میباشد. غلظت پنج میلیگرم بر لیتر هیگرومایسین بهترین محیط انتخابی برای شاخههای تراریخته شناخته شد. غلظت چهار میلیلیتر از کشت شبانه باکتری در 25میلیلیتر محیط کشت مایع و مدتزمان 72ساعت کشت مشترک شرایط مناسب را برای انتقال ژن فراهم کرد. استفاده از استوسرینگون بر نتایج بیتأثیر بود. پس از کشت مشترک، شاخهزایی ریزنمونهها روی محیط کشت انتخابی، ریشهزایی، سازگاری و انتقال به گلخانه انجام شد. آزمون هیستوشیمیایی gus در مرحله قبل از ریشهزایی بیان ژن gus را تأیید نمود. پس از انتقال گیاهچهها به گلخانه تأیید حضور ژن gus با استفاده از واکنش زنجیرهای پلیمراز(PCR) روی نمونههای برگی انجام شد. امید است، نتایج این پژوهش برای اصلاح عدس از طریق مهندسی ژنتیک و همچنین استفاده از عدس بهعنوان میزبان برای تولید ترکیبات دارویی مفید واقع شود. | ||
| کلیدواژهها | ||
| باززایی؛ ژن gus؛ عدس (Lens culinaris Medik.)؛ گیاه تراریخته؛ مهندسی ژنتیک | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 78,930 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 25,193 |
||