ارزیابی آزمون LAMP با خصوصیت رنگسنجی جهت ردیابی چشمی Ralstonia solanacearum در محمولههای سیبزمینی ایستگاههای قرنطینهای ایران | ||
| پژوهش های حفاظت گیاهان ایران | ||
| مقاله 7، دوره 31، شماره 2 - شماره پیاپی 36، تابستان 1396، صفحه 277-283 اصل مقاله (431.72 K) | ||
| نوع مقاله: مقالات پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22067/jpp.v0i0.57217 | ||
| نویسندگان | ||
| امه هانی نبوی چاشمی1؛ ساره بقائی راوری* 1؛ ماهرخ فلاحتی رستگار1؛ کبری مسلم خانی2؛ وحید جهانبخش3 | ||
| 1گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد | ||
| 2استادیار موسسه تحقیقات ثبت و گواهی بذر و نهال، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران. ایران | ||
| 3دانشگاه فردوسی مشهد | ||
| چکیده | ||
| نژاد 3، بیووار 2 از کمپلکس گونهای Ralstonia solanacearum خسارات اقتصادی قابلتوجهی را به سیبزمینی در سراسر دنیا وارد میسازد. بنابراین دستیابی به روش ردیابی حساس و اختصاصی بهمنظور حذف مواد گیاهی آلوده در مراکز تحقیقات و ایستگاههای بازرسی قرنطینه گیاهی ضروری میباشد. در مطالعه حاضر پس از جداسازی کلنیهای شبیه R. solanacearum از غدههای آلوده سیبزمینی در محیط تترازولیوم کلراید، تاییدمولکولی گونه با استفاده از آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. براساس آزمون استفاده از منابعکربنی و واکنشزنجیرهایپلیمراز اختصاصی نیز، جدایههای بدستآمده متعلق به بیووار 2 و فیلوتایپ II میباشند. آزمون بیماریزایی بر روی گیاهچههای سیبزمینی و گوجهفرنگی برای جدایهها انجام و بیماریزایی جدایهها بررسی گردید. ارزیابی غدههای آلوده و یا مشکوک به آلودگی با اعمال PCR سنتی و واکنش LAMP بر روی ژن fliC بااستفاده از DNAی استخراجشده و عصاره آلوده سیبزمینی انجامگرفت. الگوی نردبانی محصولات LAMP و ردیابی چشمی رسوب پیروفسفات و یا تغییررنگ ایجادشده در نمونههای آلوده به واسط کاربرد کالسئین، دلالتبر ردیابی موفق R. solanacearum توسط واکنش LAMP دارد. اگرچه حساسیت آزمون LAMP (CFU/ml 104) مساوی و یا کمتر از PCR سنتی است، اما دقت واکنش مزبور جهت تایید قابل اطمینان وجود R. solanacearum در غدههای سیبزمینی کافی میباشد. درمجموع، آزمون LAMP به همراه مرحله آشکارسازی کارایی چون استفاده از کالسئین، اطلاعات اولیه مناسبی را جهت غربالگری غدههای آلوده قبل از انبارداری و در حین حملونقل استانی مهیا میسازد. | ||
| کلیدواژهها | ||
| آلودگی پنهان؛ پوسیدگی قهوهای؛ ردیابی چشمی؛ fliC، LAMP | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 8,353 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,995 |
||