طراحی روشی ساده با بازدهی بالا برای تخلیص پروتئین لیزوزیم سفیده تخم مرغ با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یون.

نشریه پژوهشهای علوم و صنایع غذایی ایران

مقاله 3، دوره 11، شماره 5 - شماره پیاپی 35، آذر و دی 1394، صفحه 560-571  

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

شناسه دیجیتال (DOI): 10.22067/ifstrj.v0i0.28652

نویسندگان

زینب محمدی¹؛ دینا مرشدی ²؛ مسعود مشهدی اکبر بوجار¹؛ فرهنگ علی اکبری²

¹دانشگاه خوارزمی

²پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

چکیده

لیزوزیم سفیده تخم مرغ بدلیل ویژگیهای خاص، یکی از پروتئینهایی است که در صنایع مختلف غذایی اهمیت روز افزونی یافته است. بعنوان نانو فیبریل زیستی، آنتی بیوتیک، افزودنی غذایی طبیعی و شیرین کننده در نانو زیست فن آوری، فن آوری غذایی و بسته بندی ضد میکروبی برای پرهیز از بکار بردن افزودنیهای شیمیایی استفاده می شود. همچنین با توجه به اطلاعات بیوشیمیایی نسبتا کامل، لیزوزیم سفیده تخم مرغ بعنوان مدل برای تحقیق در مورد ساختار و عملکرد پروتئینها استفاده فراوان دارد. با توجه به کاربردهای لیزوزیم در زمینه های زیادی از علوم و فن آوری، توسعه روشی موثر، ساده و ارزان برای تخلیص این پروتئین مورد نیاز است. بر این اساس روش تخلیصی مبتنی بر رسوبدهی با استفاده از نمک و کروماتوگرافی تعویض یون طراحی و اجرا گردید. در این مطالعه پس از جداسازی سفیده از زرده تخم مرغ، عصاره حاصل طی دو مرحله توسط نمک آمونیوم سولفات 30 و 50 درصد تفکیک گردید سپس لیزوزیم توسط کروماتوگرافی تعویض کاتیون در ستون SP سفارز تخلیص شد. نتایج این مطالعه نشان داد که در این روش، لیزوزیم با فعالیت ویژه(U/mg) 333 و خلوص حدود 98 تا 100 درصد تخلیص گردید. مطالعات ساختاری با استفاده از دورنگ نمایی دورانی (CD) و فلورسانس ذاتی نیز موید طبیعی بودن کنفورماسیون در سطح ساختار دوم و سوم پروتئین بود. در این مطالعه یک روش آزمایشگاهی ساده، سریع، کم هزینه و با کیفیت بالا جهت خالص سازی لیزوزیم بهینه گردیده است.

کلیدواژه‌ها

لیزوزیم سفیده تخم مرغ

مراجع